双缩脲试剂优缺点

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双缩脲试剂是需要其中的铜离子与肽键反应,本来这种物质是用来鉴定双缩脲的,因为双缩脲和蛋白质都具有肽键所以也可以用来鉴定蛋白质,那么双缩脲试剂优缺点有哪些呢?下面就一起随小编来了解一下吧。

双缩脲(NH3CONHCONH3)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物,在强碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物,双缩脲反应产生的紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。

双缩脲试剂的优点

双缩脲法测定蛋白质测定范围能够是1~10mg蛋白质,操作简单、快捷。既适合手工操作,又适合自动化分析,重复性好、线性关系好, 双缩脲试剂可以长期保存( 若贮存瓶中有黑色沉淀出现,则需要重新配制)。

双缩脲试剂的缺点

灵敏度差,测定范围窄,样品需要量大,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。 干扰测定的物质包括有:在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。

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